Кордицепс >> Выращивание в лабораторных условиях и контроль качества

Кордицепс китайский (лат. Cordyceps chinensis) – это гриб относящийся к семейству грибов актиномицетов Clavicipitaceae. Кордицепс произрастет в горных районах Китая, Непала, Тибета на высоте от 2000 до 6000 метров. Кордицепс является необыкновенно интересным живым организмом. Жизненный цикл кордицепса включает вегетативную стадию и стадию паразитирования в личинках насекомых. На протяжении вегетативной стадии (стадия растения) кордицепс образует споры, которые попадая в организм насекомых начинают развиваться питаясь за счет организма «хозяина». С телом личинки кордицепс попадает в почву где долгое время питается корнями растений. Кордицепс обладает исключительной выносливостью, и способен долгое время выживать в условиях низких температур и недостатка кислорода. После гибели организма личинки мицелий кордицепса попадает непосредственно в почву, где и трансформируется в вегетативную форму. Надземные части гриба производят споры и жизненный цикл повторяется. В Китае и Японии кордицепс известен под названием «Dong Chong Xia Cao» и «Tochukaso». Чаще всего кордицепс употребляют вместе с личинками, в которых грибок паразитирует. На основе биологических материалов содержащих кордицепс, по рецептам народной медицины, изготавливают разнообразные лекарственные средства, обладающие антибактериальной, противовирусной и противоопухолевой активностью. Также известно тонизирующее и иммуностимулирующее действие кордицепса, его благотворное влияние на половую функцию организма.

С 1950 г. началось искусственное выращивание кордицепса в лабораториях. Возрастающий спрос на лекарства, изготовленные на основе кордицепса вызвали появление большого количества продуктов сомнительного качества. В связи с этим появилась необходимость тестировать качество продуктов изготовленных на основе кордицепса на предмет наличия в них биологически активных веществ оказывающих благотворное терапевтическое действие на организм.

Методы искусственного выращивания кордицепса исследования качества медицинских препаратов изготовленных на основе кордицепса.
Как уже упоминалось выше, ареал произрастания кордицепса в природе расположен в труднодоступных горных районах дальнего востока. В связи с этим появилась необходимость искусственного выращивания кордицепса. В последние годы был разработан метод искусственного выращивания кордицепса в лабораторных условиях. Согласно этому методы два отдельных штамма кордицепса выращиваются отдельно на средах обогащенных ядом гремучей змеи. В зоне перекреста двух штаммов, в силу обмена генетической информацией между двумя исходными штаммами, возникает новый, гибридный штамм, обладающий высокой биологической активностью и фармацевтической ценностью. Проверка качества продуктов кордицепса, заключается в определении содержания в них 6-(2-гидроксиэтил)-аденозина, вещества обладающего максимальной терапевтической активностью.

Согласно разработанной технологии, для получения кордицепса богатого биологически активными веществами мицелий кордицепса выращивается на протяжении 30 дней при температуре 20-22^oС, нормальном атмосферном давлении и рассеянном освещении. Далее мицелий выдерживается в условиях полного отсутствия света, температуре 3^oС и концентрации кислорода 50% на протяжении 15-20 недель. Индикатором качества выращенного мицелия считается присутствие в нем различных биологически активных веществ, в частности дезоксинуклеозидов: аденозин, 3`-дезоксиаденозин (кордицепин) и 6-(2-гидроксиэтил)-аденозин. Определение данных веществ проводят при помощи методов масс-спектрографии и хроматографического анализа.

Выращивание кордицепса на питательных средах

Отмечено, что кордицепс вырабатывает биологически активные вещества только в благоприятных условиях развития и роста. Выращивание кордицепса проводят на специальных средах специально адаптированных для развития грибка. Оптимальной средой для развития грибка является среда содержащая 1 часть зерен просо, 4 части зерен сорго, минеральные добавки и растительное масло (например арахисовое или соевое масло). Питательная среда, приготовленная из описанных выше компонентов, стерилизуется и затем засевается мицелием кордицепса. По мере роста кордицепс перерабатывает питательный субстрат, развивая мицелий. В конце цикла выращивания более 96% субстрата превращается в мицелий грибка. Выращенный в таких условия кордицепс содержит большое количество биологически активных дезоксинуклеозидов.

Методы гибридизации кордицепса

Техника гибридизации кордицепса направлена на выведение новых видов грибка вырабатывающих большее количество биологически активных веществ используемых в медицине. Одним из методов гибридизации является стимуляция слияния клеточных ядер различных подвидов кордицепса. Для стимуляции слияния ядер используют яд гремучей змеи. Добавленный в питательную среду где развиваются два отдельных подвида кордицепса, яд гремучей змеи стимулирует обмен генетической информации с образованием нового рекомбинантного вида (Cordyceps sinensis Alohaensis), обладающего признаками обоих видов учувствовавших в слиянии, однако генетически отличающемуся от них. Сам по себе яд гремучей змеи не оказывает токсического действия на грибок. Слияние происходит на границе зон развития двух колоний. Рекомбинантный вид образуется уже спустя несколько часов после контакта двух колоний. Для того чтобы избежать загрязнения биомассы новой рекомбинантной колонии мицелием «колоний-родителей», новую колонию, сразу после ее образования, переносят на стерильную питательную среду не содержащую змеиного яда.

Контроль качества гибридизации

Гибридизация является сложным процессом в результате которого из двух исходных родительских организмов развивается новый генетически измененный организм. Генетические различия являются причиной возникновения конкуренции между двумя колониями, развивающимися по соседству. Для того чтобы проверить является ли полученный грибок действительно рекомбинантным видом, его мицелий высевают в колонии «родителей». Если между колониями гибрида и колонией родителей возникает зона взаимного ингибирования (торможения роста), значит, полученный грибок действительно генетически отличается от родителей.

Метод гибридизации кордицепса значительно расшил возможности использования этого уникального природного ресурса в науке и медицине. Гибридные виды кордицепса совмещают в себе лучшие качества исходных родительских линий. По окончанию цикла гибридизации и культивирования биомассу кордицепса подвергают анализу на предмет наличия в ней биологически активных веществ (аденозин, 3`-дезоксиаденозин (кордицепин) и 6-(2-гидроксиэтил)-аденозин). Для сравнения, дикие виды кордицепса содержат не более 0,091% 6-(2-гидроксиэтил)-аденозина (вещество с наибольшей терапевтической ценностью), тогда как рекомбинатные виды кордицепса (Cordyceps sinensis Alohaensis) содержат до 0,323% этого вещества.

Преимущества кордицепса выращенного в лабораторных условиях

На данный момент крупнейшим производителем кордицепса в мире является американская фирма Aloha Medicinals, производящая до 175 килограммов кордицепса в месяц, что является половиной всего количества кордицепса потребляемого в мире. В лабораториях фирмы, в условиях практически идентичных природным, выращивается рекомбинантный кордицепс, содержащий большое количество биологически активных веществ.

В конце ХХ века появились сообщения об отравлении природным кордицепсом. Проведенное по этому поводу исследование установило причину отравления. Природный кордицепс паразитирует в телах гусениц. Сбор кордицепса состоит в отлавливании гусениц и их высушивании. Еще издавна сборщики кордицепса нанизывали тела гусениц на деревянные палочки, для того чтобы увеличить вес конечного продукта – сущенных гусениц. Однако в последнее время вопреки традициям сборщики кордицепса в погоне за выгодой стали нанизывать гусениц на кусочки проволоки. Длительной пребывание проволоки в теле мумифицированной гусеницы приводит к загрязнению ее тяжелыми металлами.

Выращенный в лаборатории кордицепс подвергается строгому контролю в соответствии с нормами установленными по отношению ко всем лекарственным средствам и пищевым добавкам. Соответственно, содержание в нем тяжелых металлов или других токсических веществ полностью исключено.

Фармакологические особенности препаратов кордицепса

На основе кордицепса (природного или выращенного лабораториях) изготавливают широкую гамму лекарственных препаратов. Содержащиеся в кордицепсе биологически активные нуклеозиды оказывают благотворное влияние на обменные процессы организма. В частности, аденозин признан одним из важнейших модуляторов тонуса кровеносных сосудов на уровне тканей. Под действием аденозина происходит расширение сосудов, в следствие чего, приток крови к тканям увеличивается. Улучшение кровообращения стимулирует восстановительные процессы и регенерацию тканей. Также аденозин является посредником многих химических реакций протекающих в живой клетке. Кордицепс, по мимо обычного аденозина, содержит и его активные формы, оказывающим длительное благотворное влияние на обмен веществ в организме.

Кордицепс назначают при хронических заболевания внутренних органах, хронических или тяжело протекающих инфекциях. Кордицепс помогает в лечении острых и хронических отравлений, нарушений обмена веществ, эндокринных заболеваниях.

Прежде чем начать использование любого препарата на основе кордицепса, удостоверьтесь в его качестве и обязательно посоветуйтесь с лечащим врачом. Препараты кордицепса противопоказаны беременным женщинам и кормящим матерям, а так же детям.