Как проводится ПЦР диагностика?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) диагностика начинается с забора биоматериала. В качестве биоматериала могут использоваться кровь, сыворотка крови, моча, слюна, кал и другие биологические жидкости. Забранный материал, будь то мазок или соскоб эпителиальных клеток, помещают в контейнер с раствором и как можно быстрее доставляют в лабораторию.
В дальнейшем материал подлежит исследованию на наличие вируса или другого возбудителя.

Исследование ПЦР проходит в три этапа:
1. выделение фрагментов ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) из биоматериала;
2. амплификация ДНК-фрагментов;
3. детекция обнаруженных в результате амплификации нитей ДНК.

Выделение фрагментов ДНК из биоматериала.

Суть этого этапа заключается в выделении и расщеплении чистой нити ДНК. При обработке биоматериала, добавляется специальная жидкость, которая денатурирует (удаляет) все органические вещества. Таким образом, удаляются жиры, полисахариды и остаются чистые фрагменты ДНК возбудителя.

Амплификация ДНК-фрагментов.

Выделенные и «очищенные» фрагменты ДНК в дальнейшем подлежат многократному клонированию. Лаборант копирует один фрагмент ДНК и увеличивает копии нуклеиновой кислоты в режиме цепной реакции (отсюда и название метода).
В основе данного этапа лежит естественный процесс репликации, который происходит в живом организме (in vivo), а также созданный в лабораторных условиях (in vitro).
Таким образом, накапливается необходимое количество последовательностей ДНК.

Детекция обнаруженных в результате амплификации нитей ДНК.

В процессе третьего этапа последовательности ДНК обрабатываются раствором, способным флуоресцировать (светиться). В процессе свечения выявляется ДНК вирусов, бактерий, грибков.

Диагностика методом ПЦР осуществляется в режиме цепной реакции и длится около 4 – 5 часов. Результат выдается лабораториями в течение нескольких дней.